Dans ce tutoriel, nous allons apprendre comment utiliser une seringue de mycélium en culture liquide. L'un des prérequis est donc de disposer d'une seringue de culture liquide de la variété de champignon de votre choix. Il est possible de s'en fournir sur le lien suivant. Tutoriel réalisé en partenariat avec l'entreprise Breizh Bell, entreprise en myciculture et en production low-tech de champignon bio, dans le Finistère.
Introduction au cycle du champignon
Ce qu'on appelle couramment « champignon » n'est en fait que la « fructification » temporaire et visible : le sporophore (autrefois appelé « carpophore »).
Il est le fruit d'un organisme à caractère plus durable et plus discret, formé de filaments généralement invisibles à l’œil nu lorsqu'ils sont isolés : le mycélium.
Le sporophore se présente souvent sous forme d'un pied portant un chapeau.
Pour cultiver un champignon, on cherche à reproduire les conditions extérieures naturelles. La culture de champignon se divise en trois grandes étapes.
- Inoculation : ajout de mycélium (sous forme de spores ou en culture liquide ou en gélose) dans du substrat
- Incubation : le mycélium se propage dans le substrat
- Fructification : le mycélium souhaite se reproduire par la formation d'un sporophore
L'inoculation liquide ?
Dans la myciculture, l'inoculation par culture liquide consiste à injecter du mycélium contenu dans une eau sucrée stérilisée sur un substrat.
Pourquoi est-ce génial ?
Il existe plusieurs façons de commencer une culture de champignons. L'inoculation liquide est l'une des plus facile car il suffit d'asperger un substrat avec une culture liquide. De plus, le risque de contamination est moindre qu'avec les autres méthodes.
Réception de la seringue d'inoculation liquide
Dès la réception de la seringue contenant le mycélium, placez la immédiatement au réfrigérateur, elle doit être utilisée dans les deux semaines suivantes !
Deux possibilités s'offrent à vous :
- Copie de culture liquide : L'objectif est de copier la culture liquide pour réaliser encore encore plus de culture ! La copie de culture liquide est optionnelle !
- Inoculation de grains : Cela consiste à déposer une culture liquide sur un substrat. L'inoculation de grains peut se réaliser dans un bocal ou dans un sac
En cas de copie de culture liquide, vous ne pourrez faire cette copie qu'une fois. Le mycélium s'affaiblit avec les copies et vos cultures ne produiront pas correctement.
Glossaire :
Mycélium : corps filamenteux du champignon
Inoculation : injection du mycélium dans le substrat
Culture liquide : mélange d'eau sucrée stérilisée avec du mycélium
Substrat : Aliment du champignon (grains, paille, bois...), le mycélium se fixe sur le substrat
Étape 1 - Préparation
Il est très important d'avoir des conditions les plus stériles possible, tout au long des manipulations. En effet, il existe une lutte biologique entre les espèces vivantes. Si le milieu est contaminé, le champignon va se retrouver en compétition avec d'autres organismes, il sera donc trop fragile et perdra. On va chercher à créer des conditions de culture idéales pour favoriser le champignon.
Nous vous conseillons de vous placer dans votre cuisine, sous votre hotte. Elle empêchera les poussières de se déposer sur vos cultures.
- Nettoyez votre plan de travail et chaque zone de contact potentiel avec de l’alcool à 70° avant chaque manipulation.
- Lavez vous soigneusement les mains et les bras au savon avant chaque manipulation. Vous pouvez également mettre des gants et nettoyez les à l'alcool à 70°.
- Attachez vous les cheveux et/ou mettez votre bonnet.
Nous vous conseillons vivement de manipuler votre mycélium liquide hors de la lumière du soleil, sous une lumière douce et faible (veilleuse de nuit par exemple).
Étape 6 - Inoculation de grains : jour 3
L'inoculation liquide se réalise sur le substrat propre. Soit le substrat est dans un bocal (comme sur les images), soit le substrat est contenu dans un sac de culture. Dans les deux cas, le mycélium doit pouvoir respirer.
- En cas de choix d'un bocal, percez son couvercle et nettoyez le à l'alcool 70°. Placez ensuite une compresse stérile dans l'orifice.
- Dans votre cuisine, nettoyez votre plan de travail à l’alcool.
- Allumez votre hotte et placez des bougies chauffe-plat tout autour de votre zone de travail.
- Allumez les bougies et sortez votre seringue de mycélium liquide du réfrigérateur, nettoyez (alcool 70°) et placez la au centre de la zone de travail.
- Sortez votre seringue et votre aiguille de leur sachet. Insérez l’aiguille.
- Prenez votre sac/bocal de grains stérilisés, nettoyez l’extérieur de ce sac/bocal à l’alcool 70° et placez le dans votre zone de travail.
(Attention à ce que le filtre/compresse ne touche pas d’alcool)
- Prenez deux compresses stériles et imbibez les d’alcool.
- Placez l’aiguille de votre seringue sur la flamme d’une des bougies et attendez que la pointe devienne rouge.
- Placez la ensuite entre les deux compresses imbibées d’alcool.
- Ouvrez votre sac/bocal dans la zone de travail et videz entièrement le mycélium de votre seringue sur vos grains.
- Fermez le sac/bocal immédiatement en pliant le dessus et fixez vos pinces à linge.
- Chassez l’air et placez le dans une boite non transparente à la température d’incubation adaptée à la variété (informations sur le site de Breizh Bell).
- Patientez le temps d’incubation adapté à la variété (14jours pleurotes, autres informations sur le site de Breizh Bell). Notez le dans votre agenda !
(vous pourrez regarder si votre mycélium colonise correctement vos grains au bout de quelques jours mais attention à la lumière !).
Le mycélium va se propager.
Votre culture est prête lorsque vos grains deviennent complètement blancs. La moindre tâche verte, bleue ou noir dans votre bocal est le signe d'une contamination et votre culture sera alors inutilisable.
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